تاثیر ویتامین ث بر القاء کلونی‌زایی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند در محیط آزمایشگاه

زمینه و هدف: تکنولوژی استفاده از سلول­های بنیادی به دلیل عدم وجود یک سیستم کشت ایده­آل برای رشد و تکثیر این سلول­ها محدود شده است. هدف از این مطالعه بررسی اثر غلظت­های مختلف ویتامین ث بر القاء کلونی­زایی این سلول­ها در محیط کشت است. روش بررسی: سلول­های اسپرماتوگونی بیضه­ بره­ نابالغ طی دو مرحله هضم آنزیمی جدا و به روش حذف تمایزی خالص­سازی شدند. این سلول­ها به مدت 10 روز به چهار روش تیمار شدند: گروه شاهد شامل کشت ساده سلول­های اسپرماتوگونی در محیط DMEM حاوی 1 درصد آنتی­بیوتیک و 5 درصد FBS و تیمارهای 1، 2 و 3 شامل محیط بالا و به ترتیب 20، 40 و 60 میکروگرم بر میلی­لیتر ویتامین ث بود. تعویض محیط کشت هر 3 روز انجام شد و تعداد و قطر کلونی­های تشکیل شده در روزهای 4، 7 و 10 پس از کشت به وسیله­ میکروسکوپ معکوس بررسی گردید. شناسایی سلول‌ها با رنگ‌آمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه PGP9.5 انجام شد. یافته‌های حاصل از پنج بار تکرار با استفاده از نرم افزار R و آزمون آماری آنالیز واریانس مورد بررسی قرار گرفت و 05/0>p  بعنوان سطح معنی‌داری تعیین گردید. یافته ها: مساحت کلونی­های اسپرماتوگونی در روز 7 در تیمار 2 (41/0) اختلاف معنی­داری با تیمار 3 (08/0) داشت (05/0P<). همچنین مساحت کلونی­ها در روز 10 کشت در تیمار 2 با دیگر گروه‌ها اختلاف معنی­دار داشت (05/0P<). نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان می­دهد که ویتامین ث در دوز 40 میکروگرم بر میلی­لیتر دارای تاثیر مثبت افزایشی بر مساحت کلونی­های اسپرماتوگونی است ، اما روی تعداد سلول­های اسپرماتوگونی بی تاثیر است. کلمات کلیدی: سلول بنیادی اسپرماتوگونی، ویتامین ث، کشت سلول وصول مقاله :20/9/95 اصلاحیه نهایی:23/1/96 پذیرش:21/5/96